X-GAL CAS: 7240-90-6 98% پودر کریستالی سفید تا مایل به سفید
| شماره کاتالوگ | XD90008 |
| نام محصول | X-Gal (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactopyranoside) |
| CAS | 7240-90-6 |
| فرمول مولکولی | C14H15BrClNO6 |
| وزن مولکولی | 408.63 |
| جزئیات ذخیره سازی | -2 تا -6 درجه سانتیگراد |
| کد تعرفه هماهنگ | 29400000 |
مشخصات محصول
| ظاهر راه حل | محلول شفاف، بی رنگ تا زرد روشن (50mg/ml در DMF:MeOH، 1:1) |
| چرخش نوری خاص | -61.5 +/- 1 |
| ظاهر | پودر کریستالی سفید تا مایل به سفید |
| HPLC خلوص | حداقل 99% |
| حلالیت (5٪ در DMF) | محلول (5% w/v، DMF) |
| آب KF | حداکثر 1% |
| سنجش (HPLC بر اساس بی آب) | حداقل 98% وزنی |
موارد استفاده از X-gal
X-gal (همچنین به اختصار BCIG برای 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside) یک ترکیب آلی متشکل از گالاکتوز متصل به یک ایندول جایگزین است.این ترکیب توسط جروم هورویتز و همکارانش در سال 1964 سنتز شد. نام شیمیایی رسمی اغلب به عباراتی کمتر دقیق اما دست و پا گیرتر مانند بروموکلروئیندوکسیل گالاکتوزید کوتاه می شود.X از ایندوکسیل ممکن است منبع X در انقباض X-gal باشد.X-gal اغلب در زیست شناسی مولکولی برای آزمایش وجود آنزیمی، β-گالاکتوزیداز، در محل هدف معمول خود، یک β-گالاکتوزید استفاده می شود.همچنین برای تشخیص فعالیت این آنزیم در هیستوشیمی و باکتریولوژی استفاده می شود.X-gal یکی از بسیاری از گلیکوزیدها و استرهای ایندوکسیل است که در نتیجه هیدرولیز کاتالیز شده توسط آنزیم، ترکیبات آبی نامحلول مشابه رنگ نیل را تولید می کند.
X-gal آنالوگ لاکتوز است و بنابراین ممکن است توسط آنزیم β-گالاکتوزیداز که پیوند β-گلیکوزیدی را در D-لاکتوز می شکند، هیدرولیز شود.X-gal، هنگامی که توسط β-گالاکتوزیداز شکافته می شود، گالاکتوز و 5-بروم-4-کلرو-3-هیدروکسی اندول - 1 تولید می کند. این دومی به طور خود به خود دیمر می شود و به 5,5'-dibromo-4,4'-dichloro اکسید می شود. -indigo - 2، محصولی به شدت آبی که نامحلول است.X-gal خود بی رنگ است، بنابراین وجود محصول آبی رنگ ممکن است به عنوان آزمایشی برای حضور β-گالاکتوزیداز فعال استفاده شود.این همچنین به β-گالاکتوزیداز باکتریایی (به اصطلاح lacZ) اجازه می دهد تا به عنوان گزارشگر در کاربردهای مختلف استفاده شود.
در تجزیه و تحلیل دو هیبریدی، β-گالاکتوزیداز ممکن است به عنوان گزارشگر برای شناسایی پروتئین هایی که با یکدیگر تعامل دارند استفاده شود.در این روش، کتابخانه های ژنومی ممکن است با استفاده از مخمر یا سیستم باکتریایی از نظر برهمکنش پروتئینی غربالگری شوند.در جایی که یک تعامل موفقیت آمیز بین پروتئین های در حال غربالگری وجود دارد، منجر به اتصال یک دامنه فعال سازی به یک پروموتر می شود.اگر پروموتر به ژن lacZ مرتبط باشد، تولید β-گالاکتوزیداز، که منجر به تشکیل کلونی های رنگدانه آبی در حضور X-gal می شود، بنابراین برهمکنش موفق بین پروتئین ها را نشان می دهد.این روش ممکن است محدود به غربالگری کتابخانه‌هایی با اندازه کمتر از حدود 106 باشد. برش موفقیت‌آمیز X-gal همچنین به دلیل تبخیر شدن ایندول، بوی بد قابل‌توجهی ایجاد می‌کند.
از آنجایی که X-gal خود بی رنگ است، وجود محصول آبی رنگ ممکن است به عنوان آزمایشی برای حضور یک β-گالاکتوزیداز فعال استفاده شود.
این شناسایی آسان یک آنزیم فعال به ژن بگالاکتوزیداز (ژن lacZ) اجازه می دهد تا به عنوان یک ژن گزارشگر در کاربردهای مختلف استفاده شود.
