محصولات

مسیرهای مولکولی بیماری‌زا در بیماری‌های کبدی سیروتیک مانند ویروس هپاتیت C (HCV)، هپاتیت خودایمنی (AIH) و سیروز صفراوی اولیه (PBC) مشخص نیست.ژن های بیان شده متفاوت اغلب در پاتوژنز بیماری مهم هستند.هیبریداسیون کاهشی سرکوب (SSH) یک رویکرد گسترده ژنومی است که رونوشت‌های mRNA با بیان متفاوت را غنی می‌کند.هدف ما این بود که مشاهدات جدیدی از بیان ژن دیفرانسیل در سیروز با استفاده از SSH همراه با واکنش زنجیره‌ای پلیمراز رونوشت معکوس زمان واقعی کمی (RT-PCR) انجام دهیم.رونوشت های کبدی در سیروز HCV، سیروز AIH، PBC و بافت کبد غیر بیمار توسط SSH مورد بررسی قرار گرفت.کلون‌های DNA مکمل (cDNA) برای بیان افتراقی با هیبریداسیون دات بلات مجددا غربالگری شدند و سپس توالی‌یابی شدند.بیان ژن انتخاب شده توسط RT-PCR زمان واقعی اندازه گیری شد.پس از SSH، 694 کلون برای بیان ژن های افتراقی مجدد غربالگری شدند، که 145 کلون توالی یابی شدند و مشخص شد که از 89 ژن مختلف مشتق شده اند.هفت کلون فقط با توالی‌های برچسب توالی بیان شده (EST) همولوگ بودند که ژن‌های فاقد عملکرد شناخته‌شده را کد می‌کنند.بیان بالاتنظیم شده چهار ژن با RT-PCR بلادرنگ تایید شد: غشایی 4 ابرخانواده عضو 3 (تتراسپانین CO-029) در همه اشکال سیروز، پروتئین برهمکنش جوجه تیغی (HIP) در سیروز AIH و کیتیناز 3-like-1 (HC gp-39 یا ykl-40) و تکرار اسید آرژنین گلوتامیک (RERE) در سیروز HCV.پلی مورفیسم های ژن RERE و واریانت های اسپلایس در تمام بافت های مورد بررسی مشاهده شد.تنظیم بالای تتراسپانین CO-029 در درجه اول به سلول‌های مجرای صفراوی منتقل شد.در نتیجه، مشاهدات جدید بیان ژن دیفرانسیل در سیروز انسانی با استفاده از SSH به عنوان ابزار کشف اولیه انجام شد.به طور خاص، مطالعات بیشتر در مورد ژن RERE و محصولات آن در بیماری کبد مرتبط با HCV ضروری است.