ONPG CAS:369-07-3 98.0% حداقل پودر سفید تا خاموش -سفید
| شماره کاتالوگ | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| نام محصول | ONPG (2-نیتروفنیل-بتا-D-گالاکتوپیرانوسید) |
| فرمول مولکولی | C12H15NO8 |
| وزن مولکولی | 301.25 |
| جزئیات ذخیره سازی | 2 تا 8 درجه سانتی گراد |
| کد تعرفه هماهنگ | 29400000 |
مشخصات محصول
| خلوص (HPLC) | حداقل98.0٪ |
| ظاهر | پودر سفید تا مایل به سفید |
| راه حل(1 درصد در آب) | محلول شفاف، بی رنگ تا کمی زرد |
| محتوای آب(کارل فیشر) | حداکثر0.5٪ |
| چرخش نوری خاص [α]D20 (c=1، H2O) | - 65.0 درجه سانتیگراد تا -73.0 درجه سانتیگراد |
بحث در مورد تست ONPG (آزمون β-گالاکتوزیداز)
اخیراً سؤالاتی به طور مکرر مطرح شده است: 1. چرا می توان از آزمایش ONPG برای تشخیص تخمیر تاخیری لاکتوز استفاده کرد؟2. چرا استاندارد ملی بیان می کند که برای آزمایش ONPG باید از آهن تری ساکارید کلرید سدیم 3% (یا آهن تری ساکارید) استفاده شود؟3. برای Vibrio parahaemolyticus هنگام انجام تست OPNG چرا باید طبق استاندارد تولوئن به صورت قطره ای اضافه شود؟عملکرد چیست؟
شرکت ما اطلاعات زیادی را بررسی کرده، خلاصه کرده و در زیر با شما به اشتراک گذاشته است:
اصل: نام چینی ONPG o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside است.ONPG می تواند توسط β-گالاکتوزیداز به گالاکتوز و o-نیتروفنل زرد (ONP) هیدرولیز شود، بنابراین فعالیت β-گالاکتوزیداز را می توان با تغییر رنگ محیط کشت تشخیص داد.
لاکتوز قندی است که اکثر میکروارگانیسم ها باید آن را شناسایی کنند.متابولیسم آن به دو آنزیم نیاز دارد، یکی پرماز سلولی است، لاکتوز تحت تأثیر پرماز وارد سلول ها می شود.دیگری β-گالاکتوزیداز است که لاکتوز را به گالاکتوز هیدرولیز می کند.لاکتوز و گلوکز.بتا-گالاکتوزیداز همچنین می تواند مستقیماً بر روی ONPG عمل کند تا آن را به گالاکتوز و o-نیتروفنول زرد (ONP) هیدرولیز کند.حتی با تخمیرکننده های تاخیری لاکتوز می توان آن را در 24 ساعت انجام داد.بنابراین، نتایج مشاهدات برداشتن کشت 1 از شیب آگار و تلقیح آن را در یک دایره کامل در دمای 36 درجه سانتیگراد برای 1-3 ساعت و 24 ساعت توضیح می دهد.اگر بتا گالاکتوزیداز تولید شود، در عرض 1-3 ساعت زرد می شود، اگر چنین آنزیمی وجود نداشته باشد، در 24 ساعت تغییر رنگ نمی دهد.
با توجه به دو آنزیم فوق، میکروارگانیسم ها را می توان به دسته های زیر تقسیم کرد:
1 باکتری تخمیر کننده لاکتوز (18-24 ساعت) با پرماز و β-گالاکتوزیداز P + G +.
2 تخمیر لاکتوز تاخیری (بیش از 24 ساعت طول می کشد) فاقد پرماز اما دارای گالاکتوزیداز: P-G+.
3 تخمیر کننده غیر لاکتوز فاقد پرماز و گالاکتوزیداز: P-G-.
آزمایش ONPG را می توان برای تشخیص باکتری های تخمیر کننده لاکتوز (P-G+) از باکتری های لاکتوز غیر تخمیری (PG-) استفاده کرد، مانند:
1 تخمیرهای لاکتوز دیررس (P-G+) را از تخمیرکننده های غیر لاکتوز (P-G-) متمایز کنید.
(الف) سیتروباکتر (+) و سالمونلا آریزونا (+) از سالمونلا (-).
(ب) Escherichia coli (+) از Shigella sonnei (-).
چرا سنجش ONPG با استفاده از کشت یک شبه روی تری ساکارید آهن کلرید سدیم 3 درصد (تری ساکارید آهن) انجام شد؟شرکت ما اطلاعات زیادی را مورد بررسی قرار داده است، اما هیچ بیانیه روشنی وجود ندارد.فقط در وب سایت FDA نوشته شده است که "کشت های مورد آزمایش را بر روی شیارهای آهن آگار سه گانه تلقیح کنید و به مدت 18 ساعت در دمای 37 درجه سانتی گراد (یا دمای مناسب دیگر، در صورت نیاز) انکوبه کنید. مایل های آگار مغذی (یا دیگر) حاوی 1.0 درصد لاکتوز نیز ممکن است استفاده شود.یعنی: باکتری های مورد آزمایش بر روی محیط آهن تری ساکارید تلقیح و در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 18 ساعت کشت داده شدند.نوترینت آگار مایل (یا دیگر) محیط حاوی لاکتوز 1 درصد نیز قابل قبول است.بنابراین، استنباط می شود که محیط آهن تری ساکارید حاوی لاکتوز است.پس از رشد یک شبه، باکتری ها بتا-گالاکتوزیداز فعال خوبی تولید کرده اند.با استفاده از چنین باکتری هایی، ONPG می تواند توسط β-گالاکتوزیداز سریعتر تجزیه شود.پدیده تجربی سریعتر و بهتر آشکار می شود.علاوه بر این، افزودن قطره ای تولوئن و حمام آب به مدت 5 دقیقه، همگی به منظور آزادسازی کامل β-گالاکتوزیداز هستند.
