محصولات

LecA (PA-IL) یک لکتین سیتوتوکسیک و چسبنده تولید شده توسط سودوموناس آئروژینوزا است که گالاکتوزیدهای آبگریز را با ویژگی و میل ترکیبی بالا متصل می کند.با استفاده از همجوشی ترجمه lecA-egfp و تجزیه و تحلیل immunoblot ماتریکس خارج سلولی بیوفیلم، نشان می‌دهیم که lecA در سلول‌های رشد یافته در بیوفیلم بیان می‌شود.در سنجش بیوفیلم استاتیک بر روی پلی استایرن و فولاد ضد زنگ، عمق و پوشش سطح بیوفیلم با جهش lecA کاهش یافت و در سویه تولید بیش از حد LecA PAO-P47 افزایش یافت.پوشش سطح بیوفیلم توسط سویه اصلی، PAO-P47، اما نه جهش یافته lecA روی کوپن های فولادی، نیز با رشد در حضور ایزوپروپیل-بتا-D-تیوگالاکتوزید (IPTG) یا p-نیتروفنیل-آلفا-D-گالاکتوزید مهار شد. NPG).علاوه بر این، بیوفیلم‌های بالغ نوع وحشی که در غیاب این گالاکتوزیدهای آبگریز تشکیل می‌شوند، می‌توانند با افزودن IPTG پراکنده شوند.در مقابل، افزودن p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) که میل ترکیبی بالایی برای P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n دارد، هیچ تأثیری بر تشکیل یا پراکندگی بیوفیلم نداشت.رشد پلانکتونیک P. aeruginosa PAO1 تحت تأثیر حضور IPTG، NPG یا NPF قرار نگرفت، همچنین این سویه قادر به استفاده از این قندها به عنوان منابع کربن نبود، که نشان می‌دهد اثرات مشاهده شده بر تشکیل بیوفیلم به دلیل مهار رقابتی لیگاند LecA است. الزام آور.نتایج مشابهی نیز برای بیوفیلم‌هایی که تحت شرایط جریان دینامیکی روی کوپن‌های فولادی رشد کرده‌اند به دست آمد، که نشان می‌دهد LecA به معماری بیوفیلم P. aeruginosa تحت شرایط مختلف محیطی کمک می‌کند.

آلفا-L-فوکوزیداز (EC 3.2.1.51) قادر به آزاد کردن باقی مانده t-fucosyl از زنجیره جانبی الیگوساکارید زایل‌گلوکان در برگ‌های گیاهان آرابیدوپسیس شناسایی شده است.علاوه بر این، یک آلفا-ال-فوکوزیداز با ویژگی سوبسترای مشابه از برگ‌های کلم (Brassica oleracea) خالص شد تا یک باند منفرد در SDS-PAGE ارائه شود.دو توالی پپتیدی از این باند پروتئینی به دست آمد، و از آنها برای شناسایی یک ژن آرابیدوپسیس که برای یک آلفا-فوکوزیداز کدگذاری می‌کند استفاده شد که ما پیشنهاد می‌کنیم AtFXG1 نامیده شود.علاوه بر این، یک ژن آرابیدوپسیس با همسانی با آلفا-L-فوکوزیدازهای شناخته شده نیز یافت شده است و ما پیشنهاد کردیم که آن را AtFUC1 نامگذاری کنیم.هر دو AtFXG1 و ATFUC1 به صورت هترولوگ در سلول های Pichia pastoris و فعالیت های آلفا-L-fucosidase ترشح شده به محیط کشت بیان شدند.آلفا-L-فوکوزیداز کدگذاری شده توسط AtFXG1 در برابر الیگوساکاریدهای زایل‌گلوکان XXFG و همچنین در برابر 2'-fucosyl-lactitol فعال بود اما در برابر p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside فعال نبود.با این حال، AtFUC1 هترولوگ بیان شده تنها در برابر 2'-fucosyl-لاکتیتول فعال بود.بنابراین، اولی باید با متابولیسم زایل‌گلوکان مرتبط باشد.