محصولات

بهبود استفاده از نیتروژن در گاو به منظور تضمین تولید پایدار گاو مهم است.از آنجایی که پورین ها و پیریمیدین ها (PP) بخش قابل توجهی از نیتروژن شکمبه را تشکیل می دهند، درک بهتر از جذب و متابولیسم واسطه ای PP ضروری است.کار حاضر توسعه و اعتبار یک روش حساس و خاص را برای تعیین همزمان 20 پورین (آدنین، گوانین، گوانوزین، اینوزین، 2'-دئوکسی گوانوزین، 2'-دئوکسی‌اینوزین، گزانتین، هیپوگزانتین)، پیریمیدین‌ها (تیمینیتین، سیتوزین) توصیف می‌کند. اوراسیل، سیتیدین، یوریدین، تیمیدین، 2'-دئوکسی‌اوریدین) و محصولات تخریب آنها (اسید اوریک، آلانتوئین، بتا آلانین، اسید β-اوریدوپروپیونیک، اسید β-آمینو ایزوبوتیریک) در پلاسمای خون گاوهای شیری.تکنیک مبتنی بر کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا همراه با طیف‌سنجی جرمی پشت سر هم یونیزاسیون الکترواسپری (LC-MS/MS) با استانداردهای کالیبراسیون منطبق با ماتریس و ترکیبات مرجع با برچسب ایزوتوپی پایدار ترکیب شد.تجزیه و تحلیل کمی توسط یک روش پیش تصفیه جدید شامل رسوب اتانول، فیلتراسیون، تبخیر و بازسازی انجام شد.پارامترهای جداسازی و تشخیص در طول تجزیه و تحلیل LC-MS/MS مورد بررسی قرار گرفت.تأیید شد که استفاده از یک مدل کالیبراسیون ورود به سیستم به جای یک مدل کالیبراسیون خطی منجر به کاهش درصد CV می‌شود و عدم برازش آزمون رگرسیون خطی رضایت‌بخشی را نشان می‌دهد.این روش محدوده غلظتی را برای هر متابولیت مطابق با نمونه های واقعی پوشش می دهد، به عنوان مثال گوانین: 0.10-5.0 میکرومول در لیتر، و آلانتوئین: 120-500 میکرومول در لیتر.درصد CV برای محدوده های کمی انتخاب شده زیر 25 درصد بود.این روش دارای تکرارپذیری خوب (CV%≤25%) و دقت متوسط ​​(CV%≤25%) و بازیابی عالی (91-107%) است.همه متابولیت‌ها پایداری طولانی‌مدت خوبی و پایداری خوبی در درون اجراها (CV%≤10%) نشان دادند.درجات مختلفی از اثرات ماتریکس مطلق در پلاسما، ادرار و شیر مشاهده شد.تعیین اثرات ماتریکس نسبی نشان داد که این روش برای تقریباً تمام متابولیت‌های PP بررسی شده در پلاسمای استخراج‌شده از یک شریان و وریدهای کبدی، کبدی و گاسترو اسپلنیک و به استثنای چند مورد، برای گونه‌های دیگر مانند مرغ، خوک، مناسب است. راسو، انسان و موش.